كرياتينين المادة الأخرى اللي بتشيك على وظائف الكلى
is a non-protein nitrogen waste product formed in
muscle. مادة الكرياتينين هي إحدى المواد اللي بتحتوي
على نيتروجين ولا تعتبر من ضمن البروتينات وهي فضلات
بتتكون في العضلات ولازم الجسم يتخلص من هذه الفضلات
ويخرجها عن طريق الـ urine. كيف؟ العضلة في حالة الـ
contraction، الإنقباضات، وفي حالة الشغل، ولما
يكون بدها طاقة، جواها في العضلات مادة اسمها
الكرياتين. هذه المادة بتستخدمها العضلة من أجل
الحصول على الطاقة، ومن أجل أداء العمليات الحيوية
الخاصة فيها. لكن في حال صار في عندي relaxation
استرخاء في العضلة، هتبطل تستخدم مادة الكرياتين
فاللي بيصير في حالة الـ relaxation للعضلة بيصير
عندي degradation تكسير لمادة الكرياتين وبتتحول هذه
المادة إلى مادة أخرى اسمها الكرياتينين اللي احنا
بدنا إياه، إذًا الكرياتينين المادة تبعتنا هي waste
product فضلات جاية من وين؟ جاية من تكسير مادة الـ
creatine في حالة الـ relaxation للعضلة
إذًا الكرياتين ممكن يتم منه نزع ماء وبتحول
لكرياتينين، أو الكرياتين ممكن يكون مربوط بـ
phosphate group. لو نزعتي منه الـ phosphate group
بتحول لكرياتينين، وهذه العملية بتصير في حالة الـ
relaxation، لما العضلة ما بدها مادة الكرياتين فيها
فبتم تحويل الكرياتين لكرياتينين
طبعًا هذه المعلومات فقط، يعني لازم تعرفوا
أن الكرياتينين من وين جاي؟ للمعرفة، filtered by the kidney
and excreted in the urine. هذا الكرياتينين ممنوع
يظل في الدم لأنه فضلة بتكون في العضلة، بعد هيك بيرجع
على الدم، فلازم الجسم يتخلص منه، فيروح الكرياتينين
على الكلى، والكلى بتعمل له excretion، تخرجه مع الـ
urine. الكرياتينين بيفلتر بسهولة في الـ glomerular
filtration، وليس مستعمل بسبب الـ tubule. حقيقة يا جماعة
إن كل الكرياتينين بيصير له excretion مع اليورين. إذًا
الكرياتينين مادة فضلات، waste product بيصير لها
فلترة عن طريق الكلى وبتخرج مع الـ urine كلها، إلا
جزء بسيط جدًا جدًا، يعني أعشار من الكرياتينين بيبقوا
في الدم. يعني جزء بسيط بيصير له reabsorption، بتم
إعادة امتصاصه للدم، بسيط جدًا، مش زي الـ urea.
الـ urea حكينا 40% بيصير له إعادة امتصاص، أما
الكرياتينين كله بيطلع مع الـ urine برا الجسم
باستثناء جزء ضئيل جدًا بيبقى في الدم. The amount
excreted daily is a function of muscle mass and is
not affected too much by diet. تركيز الكرياتينين يا
جماعة ما بيتأثر بالأكل، مش زي اليوريا، تمام؟ تركيز
الكرياتينين بيعتمد على الـ muscle mass، حجم العضلة
هنا الرجال عندهم تركيز الكرياتينين في الدم أعلى
من النساء، ليش؟ لأن الرجال الـ muscle mass، حجم العضلة
عندهم أكبر، وبالتالي بتكون عندهم فضلات أكثر، بتكون
عندهم كرياتينين أكثر، تمام؟ فالكرياتينين تركيزه
عند الرجال أعلى من النساء، بإيش بسيط حسب الـ muscle
mass. طيب عند الأطفال حجم العضلات كتير صغيرة
وبالتالي تركيز الكرياتينين في الدم عندهم بيكون
قليل جدًا جدًا، حسب الـ muscle mass، حسب حجم العضلة
تمام؟
الـ clinical significance، أهمية الفحص. «Elevated
creatinine» is found with abnormal renal function.
الناس اللي عندها مشكلة في الكلى، معناه الكلى مش
هتقدر تعمل فلترة، تمام؟ وبالتالي مش هتطلع
الكرياتينين مع الـ urine، فبيضل الكرياتينين محجوز
في الدم ويزيد تركيزه. هذا الاختصار اختصار لـ
glomerular filtration rate، معدل الفلترة، تمام، لـ
glomerulus، هذا العضو اللي موجود في الكلى، موجود في
تركيبة الكلى، المسؤول عن الفلترة اللي بيفلتر الدم
وبيطلع المكونات اللي بدنا نتخلص منها مع الـ urine، الفضلات
وبرجع الشغلات المهمة للدم. Therefore, any condition
that reduces the glomerular filtration rate will
result in. أي حالة تؤدي إلى نقص في معدل الفلترة
يعني لو الكلى انصابت بمشكلة، هذه المشكلة أثرت على
الكلى وبالتالي الكلى بطلت تقدر تفلتر. إذًا هذه الـ
condition، قللت من معدل الفلترة من الـ glomerulus
filtration rate. لما الـ kidney تصير قدرتها على
الفلترة ضعيفة، معناها مش هتقدر تطلع الكرياتينين مع
الـ urine، مش هتطلعوا برا الجسم، وهيبقوا محجوز في
الدم، والـ result إن إيش هيصير؟ A less excretion
from the body. كمية الكرياتينين اللي هتخرج مع الـ
urine هتكون قليلة، with a consequent rise in the
concentration of creatinine in the blood. إذًا
الكرياتينين كميته اللي بتطلع برا الجسم قليلة، وين
هتروح الكرياتينين؟ هيبقوا محجوز في الدم ويزيد
تركيزه في الدم، تمام؟ إذًا أي حالة مرضية بتأثر على
الكلى وبالتالي بتقلل من معدل فلترة الكلى، هيؤدي
ذلك إلى ارتفاع الكرياتينين في الدم ومنع خروجه مع
اليورين. Serum creatinine is a better indicator
of renal function than either of the blood
urea nitrogen or the uric acid. يعتبر فحص
الكرياتينين أفضل من فحص اليوريا وأفضل من فحص الـ
uric acid، المادة الثالثة، ليش؟ لأن فحص الكرياتينين
يعتبر specific للـ renal function، فحص متخصص للكلى
ومشاكله، يعني مثلًا لو انصاب المريض بمرض معين أو لا،
خلينا نفهمها بشكل آخر، اليوريا حكينا بتتأثر
بالأكل، بتتأثر بالجفاف، يعني بتزيد في حالات غير
مشاكل الكلى، لكن الكرياتينين فقط بيزداد
الكرياتينين إذا كان عندي مشكلة في الكلى بس، لكن أي
مشكلة في مكان آخر، في organ آخر، الكرياتينين ما
بيتأثر. الكرياتينين فقط بيتأثر إذا الكلى صار فيها
خلل، وما بيتأثر إذا أكلت أكلات مليانة ولا لأ
بالبروتينات، ما بيتأثر بالجفاف، يعني لو صار في جفاف
ما بيتأثر تركيزه. عشان هيك هو أفضل من
الفحوصات الأخرى لأنه متخصص لمشاكل الكلى وما بيزيد
إلا إذا كان في عندي مشكلة في الكلى. طبعًا بيكمل بالـ
clinical significance for renal transplant
patients، and an increase in serum creatinine of 2
milligrams per liter has been used as a criterion
of establishing rejection. هنا كمان فايدة لفحص
الكرياتينين، الناس اللي بتزرع كلى، طبعًا أنتم
بتعرفوا الزراعة مشاكلها، الـ rejection، الرفض، تمام؟ وهل
الجسم هيقبل العضو المزروع فيه ولا لأ؟ هيهاجمه من
قبل مناعة الشخص ولا لأ؟ طبعًا الإنسان اللي بيزرع
كلى، بعد الزراعة لازم أتابعه، بتابعه بأي فحص؟ بفحص
الكرياتينين، كل يومين، ثلاثة، أربعة، بعمله الفحص
ووجدت أنه الكرياتينين بدأ يرتفع شوية، بفهم
أنه ممكن احتمال يصير في عندي rejection. هذه الفايدة
للفحص فقط، هذا اللي بدنا نفهمه. أما 2 milligrams per
liter وزاد وقد إيش مقدار الزيادة مش ضروري للحفظ،
تمام؟ في الناس الأخرى، تغيير الكرياتينين من 2 ملي
جرام على لتر، يمثل 20% تقريبًا. أيضًا
الكرياتينين فحص غير أنه مهم لمتابعة وظائف الكلى
ولمتابعة في حالات الزراعة، برضه مهم، إنه لو
الكرياتينين في الدم اتغير بمعدل 2 milligrams per
liter، يعني ارتفع، would represent هذا معناه مؤشر
ودليل إنه 20% من الكلى loss للـ function تبعتها، 20
% من الكلى فقدت وظيفتها، تمام؟ يعني لو اتغير
الكرياتينين في الدم بمقدار 2 milligrams per liter،
يعني ارتفع، هذا مؤشر إن 20% من وظيفة الكلى فقدت
وظيفتها، وفي احتمال في المستقبل يصير في عندنا فشل كلوي
إذًا هنا بيبين لكم أهمية الـ creatinine test للـ
specimen. One can analyze serum, plasma, or diluted
urine. إذًا سيرم، بلازما، الـ urine برضه ممكن أفحص فيه
الـ creatinine، بس لأن تركيز الـ creatinine في الـ
urine عالي كتير فلازم أخفف العينة قبل ما أستخدمها
عشان هيك كتبنا لكم الـ diluted urine. The common
anticoagulants, fluoride and heparin, don't cause
interference. يعني الـ anticoagulants المسموح فيه
لما بدي أفصل البلازما إما fluoride أو heparin
«though heparin, which cannot be formulated as an
ammonium salt, must be avoided in enzymatic
methods that measure ammonia production». بيقول لي
إن أملاح الـ ammonium heparin،
ممنوعة. يعني الـ ammonium heparin ممنوع كـ
anticoagulant. ليش؟ وخاصة لو طريقة الـ kit هي
enzymatic methods، طريقة شغل الكرياتينين لو كانت
enzymatic methods، ممنوع تستخدمي الـ ammonium
heparin كـ anticoagulant، لأن بهذه الطريقة في الـ
reaction هيكون فيه إنتاج للأمونيا. تمام؟ طب وإنتِ
أصلًا الـ anticoagulant فيه أمونيوم، الأمونيوم لو
انكسرت الأمونيوم هي NH4، لو انكسرت هتعطيكي أمونيا
NH3، وبالتالي هيصير فيه تداخل بين الأمونيا اللي
نتجت عن التفاعل والأمونيا اللي أصلًا جاية من
الـ anticoagulant، الأمونيوم heparin، تمام؟ عشان هيك
ممنوع بتاتًا الـ ammonium heparin كـ anticoagulant.
تخزين العينة، السيرم والبلازما، سبعة أيام في الثلاجة
وعند درجة حرارة الغرفة، وثلاثة أشهر في الفريزر.
Urine should be diluted 1:100. لازم أخفف
عينة الـ urine اللي بدي أفحص فيها الكرياتينين، واحد
إلى مئة. Bacterial contamination has been found to
falsely lower creatinine values measured using the
Jaffe reaction. Jaffe reaction، هذه برضه طريقة أخرى من
خلالها إحنا بنفحص تركيز الكرياتينين. برضه في فحص
الكرياتينين زي ما حكينا في اليوريا، إحنا بنخاف كمان
هنا من الـ bacterial contamination. هناك في اليوريا
حكينا البكتيريا بتفرز urease، بيكسر اليوريا، وبالتالي
العينة بتخرب. هنا كذلك البكتيريا بتفرز مواد
هذه المواد بتقلل من تركيز الكرياتينين بشكل خاطئ في
العينة. The mechanism of this interference appears
to be bacterial production of substances that
retard the rate of the Jaffe reaction. بتحكي لي هنا
البكتيريا بتفرز مواد، هذه المواد بشكل خاطئ بتقلل
من تركيز الكرياتينين اللي موجود في العينة، خاصة لو
استخدمت طريقة الـ Jaffe reaction. إذًا لازم أجنب الـ
bacterial contamination، خاصة كمان لما أشتغل فحص
الكرياتينين في اليورين وفي الكرياتينين، ممنوع الـ
bacterial contamination.
الـ analytical methods، الطرق التحليلية لفحص
الكرياتينين. أول طريقة هي الـ Jaffe reaction، وهذه
الطريقة اللي كثيرًا يعني بتعتمدها وبتستخدمها. Most 176 00:14:
الـ PEP هتتحول لبيروفيت، البيروفيت مع الـ NADH
و الـ H+ هيعطيني لاكتات و NAD+ في وجود اللاكتات هيدروجينيز
هيدروجينيز طبعا يا جماعة، هنا امتصاص الكرياتينين
هيكون على الـ UV عند 340، لأنه حكيت لكم لو كانت
نهاية التفاعل NADH لـ NAD أو العكس من NAD لـ NADH
يعني امتصاص المركب هيكون في منطقة الـ UV هذه
الطريقة الكتاتنا ما بنستخدمها، تمام؟ الطرق المتوفرة
عندنا في الجامعة هي الـ Jaffe Method، مبدأ شغلنا
طريقتنا في الكرياتينين، حكينا كاينتك جاف ميثود
طريقة الجاف ميثود مش الكولوري مترية، مش اللي
بتعتمد على شدة اللون، إنما هي الكاينتك، نشوف مع
بعض الكرياتينين بيكون موجود في البلازما أو السيروم
هيتفاعل مع مادة الصوديوم بيكربونات أو البيكرِيك
أسيد اللي موجود في الـ Reagent، محصلة التفاعل إعطاء
مركب اسمه "Creatinine-Picrate Complex" أنا
بما أن طريقتي كاينتك، يعني ما بقيس أنا شدة لون إنما
إحنا بنقيس التغير في معدل امتصاص الكرياتينين عند
وقت معين، إذن إحنا بدنا نقيس التغير في معدل الامتصاص
لمادة الكرياتينين عند وقت معين، وهذا التغير اللي
بيصير في الامتصاص هيتناسب تناسبا طرديا مع تركيز
الكرياتينين في العينة، الاختلاف في الامتصاص إحنا
بدنا نقيسه، التغير في معدل الامتصاص عند وقت معين at
a fixed time خلال ما بتتكون الـ Complex، وهذا بيتناسب
تناسبا طرديا مع تركيز الكرياتينين في العينة، هنفهم
أكتر المبدأ في الـ procedure، تمام؟
الـ procedure ياريت تركزوا مع بعض لأنها شوية مختلفة
بما إنها طريقة كاينتك، ما بتعتمد على شدة اللون، أول
شيء بتحضري الـ working reagent، يعني كت الكرياتينين
يا جماعة بيكون فيه two reagents، reagent واحد و
reagent اتنين، بنخلط الـ two reagents مع بعض، مثلا
بتحطي 4 parts من reagent A مع 1 part من reagent B
ما بدي أكوا تعرفوا قد ايش احط من هذا وقد ايش احط من هذا بس
الفكرة working reagent أنه أنا بخلط two reagents
مع بعضهم البعض، وهذا الخليط صار اسمه working reagent
ضروري وأنا بحطه في الـ water bath بدفيه يعني قبل
ما استخدمه لازم أدفيه، بعد هيك بتروحي تجيبي الكيوفية
فاضية زي ما هي و بتحطيها جوا الجهاز، جوا الـ
Spectrophotometer، تمام؟ بتروحي تاخدي 1 ml من الـ
working reagent اللي حضرتيه وبتحطيه في الكيوفية
اللي موجودة في الجهاز، بتحطي 1 ml من الـ working
reagent في الكيوفية اللي موجودة في الجهاز وبتصفري
عليه، إذا صار عندي working reagent موجود في الكيوفية
في الجهاز بصفر عليه، بعدين بتفتحي الجهاز، بتروحي تجيبي
علبة الـ standard اللي بتكون موجودة في الـ kit، تاخدي
منها 100 microliter، وهذه الـ 100 microliter من الـ
standard بتحطيها فوق الـ 1 ml، تمام؟ أول ما تحطي الـ
100 microliter فوق الـ 1 ml، بتشغلي الـ stopwatch
بتشغلي الساعة، على طول بتعملي mix وبتسكري الجهاز، أول
ما يصير عندك تلاتين seconds على الساعة، تاخدي
absorbance رقم واحد، وبتخلي الساعة تضلها تعد لما
يصير تسعين seconds، بتاخدي absorbance اتنين، إذا على
التلاتين ثانية تاخدي قراءة، وعند التسعين ثانية تاخدي
قراءة تانية، إذن عينة الـ Standard صار إلها two
absorbances، absorbance one و absorbance two، تطرحي الـ
two absorbances من بعض، تطرحي الـ absorbance الثاني
من الـ absorbance الأول، بتطلعلك عندك الـ absorbance
اللي هتستخدميه في القانون عشان تحسبي تركيز
الكرياتينين، ونفس الشيء بنعمل للـ sample، نعيد كمان
مرة، بروح أجيب 1 ml من الـ working reagent اللي
دفيته في الـ water bath، بحطه في الـ cuvette وبحطه
في الجهاز وبصفر عليه، بعتبره كأنه blank، بفتح الجهاز
بروحة آخذ 100 ميكرو لتر من الـ patient serum أو
البلازما، بحطها فوق الـ working reagent اللي موجود
في الجهاز، في الكيوفية، أول ما أحط 100 ميكرو لتر من
الـ serum start stopwatch، شغل الساعة بسرعة، اعمل mix
سريع، وسكر الجهاز، لما بيصير عندك على الساعة تلاتين
ثانية بتاخدي قراءة أولى، absorbance واحد، ولما
بتصير عندك الساعة تسعين ثانية بتاخدي absorbance
رقم اتنين، وهيك الـ reaction بيخلص، تمسك الكيوفية و
بترميها، صار عندك 2 absorbance للـ sample تبع
المريض، تطرحي absorbance 2 ناقص absorbance 1، لـ
absorbance الثاني بتطرحيه من الأول، بتطلع لك الـ
absorbance اللي هتستخدميه في القانون، تيجي على
بير لامبرت، طبقي الـ concentration للـ sample بيساوي الـ
absorbance للـ sample جبته على الـ absorbance للـ
standard جبته، ضرب الـ Concentration للـ Standard
على علبة الـ Standard بتشوفي تركيز الكرياتينين
وبالتالي بتطبيق بير لامبرت تحصلي على تركيز الكرياتينين
في الدم، واضح؟ والجهاز بتضبطي الـ wavelengths تبعته
على 500 نانومتر
إذن لما تحسبي absorbance واحد و absorbance اتنين
يعني two absorbances و تطرحيهم من بعض، هذه طريقة
بنسميها kinetic، أنه أنا بحسب التغير في معدل
الامتصاص، تمام؟ التغير في الـ absorbance، وهذا التغير
في الـ Absorbance هو اللي بيتناسب مع تركيز
الكرياتينين في العينة، يعني مبدأ شغلنا مش
كولوري متري، ما بيعتمد على شدة اللون، إنما بيعتمد
على التغير في معدل الامتصاص للكرياتينين، تمام؟ الـ
Normal Range للكرياتينين عند البالغين، للـ Female و
Male و للـ Child عند الأطفال، عند الإناث من 0.6 لـ 1.1
ميلي جرام per deciliter، شايفين كده تركيزه
الكرياتينين؟ كده قليل جدا في الدم، عند الذكور من 0.9
لـ 1.3، أكتر شوية لأن حجم العضلات عندهم أكبر
وبالتالي كمية الكرياتينين عندهم أعلى، أما للـ Child
العكس، عضلاتهم صغيرة، كمية الكرياتينين عندهم بتكون
قليلة، من 0.3 لـ 0.7، الوحدة بالـ milligram per
deciliter، بين الأقواس عند الإناث 53 لـ 97، هذا الـ
normal range، ولكن الوحدة هنا بالـ micromole per
liter، لكن حقيقة إحنا بنستخدم الوحدة الشائعة
والدارجة عندنا الـ milligram per deciliter، فاللي
بين الأقواس هذا الـ normal range، ولكن الوحدة
بالـ micromole per liter، هذه طريقة الـ Jaffe Method، أما
الـ Enzymatic method لها normal range خاص فيها، نفس
الكلام، تمام؟
يعني كل طريقة بيكون إلها Normal Range خاص فيها
اللي بين الأقواس النتيجة بالـ micro mole per liter
أما اللي من غير أقواس بالـ milligram per deciliter
والوحدة الشائعة للبولي يوريا والكرياتينين و الـ uric acid
بالـ milligram per deciliter